Препон родилась в Ватчунге, штат Нью-Джерси, младшей из пятерых детей в семье русских евреев и ирландских католиков. В 1995 году она начала свою телевизионную карьеру, а в дополнение также работала моделью в Париже, Милане и Бразилии.

С 1998 по 2006 год, Препон исполняла роль Донны Пинсиотти в ситкоме Fox «Шоу 70-х». В период съемок в шоу, она также появилась в нескольких кинофильмах, наиболее значимый из которых «Карла», где она сыграла роль Карлы Хомолка. Вскоре после завершения шоу, она получила ведущую роль в драматическом сериале ABC «Дорога в осень». Шоу было закрыто после двух коротких сезонов в 2008 году.

Препон появилась в эпизодах многих сериалов после закрытия «Шоу 70−х», таких как «Доктор Хаус», «Как я встретил вашу маму» и «Касл», а также снималась в телефильмах для канала Lifetime. Следующую крупную роль она сыграла лишь в 2012 году, снявшись в провальном ситкоме NBC «Где ты, Челси?». В 2013 году Препон начала играть роль лесбиянки и члена международного наркокартеля в сериале Netflix «Оранжевый — хит сезона». Она была членом регулярного состава в первом сезоне и была понижена до периодического статуса во втором. С третьего сезона вновь была повышена до основного состава].

В интервью 2007 года журналу «Women’s Health» заявила, что увлекается саентологией.